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豬白細胞介素-6基因的非融合原核表達研究
用DNA重組技術,將已克隆的豬IL-6基因閱讀框片段插入非融合原核表達質(zhì)粒pBV220中的適當位置,獲得重組質(zhì)粒pBVpIL-6,轉化大腸桿菌DH5α后,42℃誘導陽性表達菌.經(jīng)SDS-PAGE檢測發(fā)現(xiàn)目的蛋白獲得了高效表達,表達量約占總蛋白的20%.表達的蛋白以包涵體形式存在,包涵體經(jīng)過變性溶解和復性后用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)做定性定量檢測.ELISA結果證實了所表達的蛋白為豬IL-6,復性后具有一定活性,并測出了復性后活性蛋白的濃度.

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